豬細小抗體檢測卡采用了快速免疫層析檢測技術,用于檢測全血、血清中的細小病毒抗體。把樣本加入到加樣孔后,與膠體金標記的PPV抗原一起沿層析膜移動。若樣品中存在抗PPV抗體時,與檢測線上的抗原結合而顯示酒紅色。如果樣品中不存在PPV抗體時,則不產生顏色反應。
【原 理】
豬細小病毒抗體檢測試劑盒由預包被豬細小病毒抗原的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿樣本中豬細小病毒抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本,經溫育后若樣品中含有豬細小病毒抗體,則將與酶標板上抗原結合,經洗滌除去未結合的其他成分后;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復合物發(fā)生特異性結合;再經洗滌除去未結合的酶標記物,在孔中加TMB底物液,與酶標結合物反應形成藍色產物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關;加入終止液終止反應后,產物變?yōu)辄S色;用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值,即可知樣品是否含有豬細小病毒抗體。
【組份】1快速檢測卡50個2吸管50個3抗體滴度比色卡1張4一次性衛(wèi)生手套1包5說明書1份
【操作方法】1.采集全血分離血清(2000-3000轉/分離心5-15分鐘,或4℃過夜自然析出),或采用加抗凝劑的全血作為檢測樣本。也可采用不加抗凝劑的全血,但必須立即進行檢測。
2.撕開鋁箔包裝袋,取出檢測卡,放于平整、干凈的臺面上。
3.采用配套吸管吸取已采集的樣本,緩慢、逐滴的準確滴加3滴到有“S”標記的加樣孔內。
4.室溫下放置10-20分鐘判斷結果,超過20分鐘結果無效。
【結果判定】1.陽性:在觀察孔內,檢測線區(qū)(T)及對照線區(qū)(C)同時出現(xiàn)紫紅色線(圖一)。細小病毒抗體滴度越高,檢測線(T)顏色越深。
2.弱陽性:在觀察孔內,檢測線區(qū)(T)及對照線區(qū)(C)同時出現(xiàn)紫紅色線,但檢測線區(qū)(T)出現(xiàn)的顏色很淺。
3.陰性:在觀察孔內,只有對照線區(qū)(C)出現(xiàn)一條紫紅色線。
4.失效:在觀察孔內,對照線區(qū)(C)和檢測線區(qū)(T)都不出現(xiàn)色線;或僅檢測線區(qū)(T)出現(xiàn)色線。